对食饵性高胆固醇家兔进行造模研究,观察黑茶和玉米花粉对高胆固醇血症的影响。结果表明,黑茶防治效果优于花粉加胆固醇组,并从血的生化、微循环变化、主要脏器、内耳及球结合模组织形态学证明黑茶具有降血脂作用。
花粉、胆固醇/黑茶、疗效
本试验通过对食饵性高胆固醇症家兔的造模研究,观察黑茶和玉米花粉对高胆固醇血症的影响,为高胆固醇症的感音神经性耳聋的防治提供依据。
一、材料与方法
(一)处理
选6月龄,体重2.6士0.3kg的健康新西兰大白兔36只,雌雄不限,同室分笼饲养,每日进食150g,自由饮水。
1、对照级。均喂普通颗粒饲料(基本饲料);2、高胆固醇组。每天每只加喂含1g胆固醇普通饲料;3、茶+胆固醇组。加喂茶饲料9g/天(茶由重庆西南农业大学食品学院提供),与普通饲料混合制成6%茶加胆固醇混合饲料;4、花粉+胆固醇组。加喂玉米花粉30g(由中国农科院植物研究所提供),与普通饲料混合制成20%玉米花粉饲料。
(二)检测指标和方法
血清胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白、超氧化物岐化酶(SOD)用化学发光法测定,脂质过氧化物(LPO)则采用沉淀比色法测定,并进行微循环、组织学观察和统计分析。
黑茶与花粉的降血脂及抗自由基的效能
二、结果与分析
表一:各组血清生化指标(X + SE)
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饲养期 |
处理 |
Ch(mg/dl) |
TG(mg/dl) |
HDL(mg/dl) |
LPO(nmol/ml) |
SOD(U/ml) |
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一个月 |
Ⅰ |
1.97 + 1.06 |
1.15+0.65 |
0.839+0.287 |
5.06+0.73 |
1192.2+145.5 |
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Ⅱ |
23.01+6.91 |
1.14+0.66 |
1.98+1.04 |
7.28+3.13 |
1371.9+138.05 |
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Ⅲ |
20.54+9.35 |
1.64+1.03 |
2.02+1.09 |
6.10+0.96 |
1334.7+198.89 |
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Ⅳ |
27.86+7.62 |
2.82+0.89 |
2.02+1.17 |
90.02+3.19 |
1448.9+191.21 |
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二个月 |
Ⅰ |
1.39+0.75 |
1.06+0.66 |
0.49+0.22 |
4.49+0.64 |
1135.7+137.88 |
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Ⅱ |
29.42+2.62 |
1.06+0.39 |
1.58+0.30 |
14.84+5.43 |
1516.4+158.32 |
|
Ⅲ |
28.71+5.24 |
0.97+0.68 |
1.49+0.48 |
10.94+3.84 |
1315.5+162.8 |
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Ⅳ |
28.86+2.77 |
1.79+0.89 |
1.49+0.51 |
11.82+5.39 |
1272.1+180.39 |
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三个月 |
Ⅰ |
1.19+0.62 |
0.90+0.22 |
0.40+0.18 |
7.43+1.53 |
440.87+88.10 |
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Ⅱ |
22.97+3.89 |
1.55+0.81 |
0.43+0.21 |
9.26+4.60 |
666.30+299.28 |
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Ⅲ |
20.01+7.16 |
1.07+0.53 |
0.45+0.17 |
8.29+2.07 |
630.85+165.70 |
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Ⅳ |
22.45+8.25 |
2.03+0.98 |
0.42+0.12 |
11.71+3.49 |
611.33+96.02 |
由表1可见,经胆固醇饲养一个月后,动物血胆固醇水平显著升高,达正常十倍以上,必将造成机体组织细胞及生物体的病理性变化,血中甘油三酯水平变化不明显,高密度脂蛋白(HDL)约增高1倍,说明大量升高血的胆固醇(Ch)主要在低密脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VIDL)两种脂蛋白中运输,这必将超过其运输能力,这种非常高的脂蛋白不甚稳定,易发生沉积或被某些免疫活性细胞所识别,从而激活免疫活性细胞产生大量活性氧,造成相应组织自由基损伤,表现在循环血中LPO水平显著升高,达正常水平的一倍以上,SOD水平略有增加,但差异不显著。
当用黑茶和花粉作为降血脂药物时,花粉组脂水平无降低趋势,而茶组似有降低趋势,但差异不显著。血LPO水平与血脂相同,黑茶组虽有降低趋势,但差异不显著。花粉组无明显明化。血SOD活力,两种治疗组间无显著变化,但花粉组较对照组明显升高(P<0.05)。血清生化指标的变化说明,饮食中高浓度的胆固醇被吸收人血后,超过了组织细胞损伤。众多临床疾病的前几天理过程与自由基对组织细胞损伤有关。在第2和3个月后血胆固醇处于高水平,并以第2月最高,第3个月有下降趋势。在第2个月时,HDL-C水平仍极显著高于对照组,但至第3个月,试验组HDL-C有下降趋势,与对照组无显著差异。这说明机体对血胆固醇代偿性运输能力已丧失,处于失代偿状态,此时的血LPO水平与第2个月相比亦有降低。在第2个月时,茶和花粉组LPO均低于胆固醇组,即可能有一定的防护作用。至第3个月,各试验组LPO水平接近,略高于对照组。血SOD活力在第2个月时,各试验组均高于对照组,但茶和花粉治疗组均低于造模组。至第3个月,对照组、治疗组和胆固醇造模组间SOD活力接近,表明各组织器官已发生严重的病变。血胆固醇及LPO水平,茶组低于花粉组,而SOD则相反,这进一步说明茶的治疗效果比花粉略好。
由结果可见,胆固醇造模组、防治各组与对照组相比,其胆固醇水平明显升高,其中用药两组与未治疗组相比,有降低趋势,以用茶治疗组效果略好。其中,花粉治疗组甘油三脂水平略有长高,可能由于花粉具有较高营养价值,富含植物油,长期大量食用后可导致血清甘油三脂水平升高。由于血胆固醇水平明显升高,必将导致机体自由基产生与清除平衡失调,血清SOD活性显示,造模组高于正常对照级组,LPO亦显著增加,这是自由基对组织细胞损伤加剧的表现。当用具有降血脂抗自由基损伤作用的茶和花粉治疗后,血清SOD活性和LPO量有下降趋势,其中以茶治疗组的防治效果略好,这与血脂水平的改变一致。茶治疗组血清LPO下降程度高于胆固醇组,表明它的作用可能主要为防治高血脂所引起的自由基损伤。以往报导亦证明茶具有抗氧化活性。
胆固醇+花粉及茶对细胞变形能力的改变
据报导,随着细胞胆固醇含量增高,其膜表面面积也增加,引起红细胞变形能力的减小,甚至破坏。细胞外缘胆固醇过量蓄积,会导致膜表面形成针状突起,如果周缘的过量胆固醇被清除后,红细胞可以恢复正常。
表二:红细胞变形指数与时间的关系
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处理 |
饲养期(月) |
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第一个月 |
第二个月 |
第三个月 |
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Ⅰ |
2.55+0.33 |
2.94+0.15 |
3.50+0.08 |
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Ⅱ |
2.12+0.15 |
1.56+0.10 |
1.63+0.06 |
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Ⅲ |
2.10+0.21 |
1.98+0.21 |
2.41+0.15 |
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Ⅳ |
2.20+0.13 |
1.44+0.07 |
2.26+0.28 |
表2表明,对照组的红细胞变形能力无明显改变,胆固醇组明显降低。从服用花粉和茶防治后第二个月开始,红细胞变形能力有明显改善,茶较花粉组好,便差异不明显。高胆固醇组的红细胞膜的稳定性和流动性均明显低于正常组。花粉组与茶叶组对球结膜微循环障碍可能有防治作用。但花粉组未见球结膜微循环障碍的改善。
胆固醇组血小板聚积率(54%)明显高于对照给(30%)、茶加胆固醇组和花粉加胆固醇组(22.5%和24.3%),但均低于对照组。血小板计数以胆固醇组最(41.3万),对照最低(13.0万),茶组和花粉组分别为20.3和26.3万。
黑茶及花粉的防治作用
黑茶组球结膜微微循环总积分值(7.0)低于胆固醇组(8.6);活体和组织学观察球结膜微血管中未见白微栓;静脉壁白斑发现率最低(27.5%)、范围最小(表1)血清胆固醇浓度高峰出现晚、持续时间短,胆固醇浓度为30mmol/L的动物数最小(2组8/9,3组5/8,4组8/9)。根据以上4点进行综合分析,黑茶对高胆固醇血症红细胞变形能力均明显改善,但茶组较花粉组更突出,可能由于其对红细胞膜上的过量胆固醇有清除作用,从而改善红细胞变形能力。
三、讨论
根据对照组与花粉、茶防治组各项指标,茶防治效果优于花粉加胆固醇组,可见黑茶有降血脂作用。黑茶具有防治动脉粥样硬化(AS)的明显作用,其作用机理在于茶色素具有显著的抗凝、促进织溶、抑制血小板的黏附、聚积和抑制动脉平滑肌细胞增生,从而阻止AS的发生和发展。黑茶抑制人体内不饱和脂肪酸的过氧化作用能力是维生素E的5至10倍。黑茶中儿茶素有较强的还原力,能延缓和中断自动氧化氢过氧化物的连锁反应,故可减少体细胞内氢过氧化物和脂类氧化物积累,保持体细胞新陈代谢的活力。黑茶防治组添加了胆固醇,故防治作用较小。我们认为,高胆固醇血症属于代谢性疾病,治疗时间较长,至少需观察半年,若临床节制胆固醇类食物,再延长服黑茶的时间,其疗效一定更显著。